一、综合安全等级评价方法概述

　　综合安全等级评价方法是对水产苗种检疫内容中感官要求、寄生虫性疾病和细菌性疾病的检疫结果进行判定的方法。主要运用模糊数学的基本理论，将各隶属项进行模糊量化，按三种检测结果分别赋予1、2、4的分值，然后将各隶属项的分值进行相加，计算出系统综合评分，根据系统综合评分的分值来判断系统的综合安全等级。

　　二、水产苗种检疫结果评分标准

　　1、感官要求共包含五项指标：

　　a、活力 b、感光能力 c、体表光洁度 d、伤残、畸形率 e、死亡率

　　各项指标的判定结果

　　感官要求 活力 感光能力 体表

　　光洁度 伤残畸形率

　　(≤3%) 死亡率

　　(≤3%)

　　判定结果 强

　　不强 敏感

　　不敏感 干净

　　不干净 正常

　　不正常 正常

　　不正常

　　感官要求评分标准：

　　①五项指标中全部指标符合要求或仅有一项指标未符合要求，则将其评分结果记为1;

　　②五项指标中其中有两项或三项指标未符合要求，则将其评分结果记为2;

　　③五项指标中其中有四项或全部指标未符合要求，则将其评分结果记为4。

　　2、寄生虫检测包括对寄生虫数量的判定及其优势种类别的鉴定，评分标准为：

　　①组织内(外)偶见寄生虫，则将其评分结果记为1;

　　②组织内(外)容易发现寄生虫，但寄生虫数量较少，则将其评分结果记为2;

　　③组织内(外)极易发现寄生虫，且寄生虫数量很多，则将其评分结果记为4;

　　3、细菌检测包括对弧菌数量的测定及其优势菌种类的鉴定，以下为弧菌总数标准化检测程序及评分标准：

　　(1)弧菌总数标准化检测程序

　　①样本处理：

　　将初样(混合样)放入初样管中，用无菌扦样器捣碎样本制成实验样本。

　　②母液及稀释液的制备：

　　用扦样器扦取0.5g(0.5ml)实验样本于母液管(内含4.5ml Nacl溶液)中，制成母液，并振荡混匀，此时母液管浓度级别为10-1。

　　用微量移液器吸取母液管中的液体0.5ml，注入A管(内含4.5ml Nacl溶液)配成浓度级别为10-2的稀释液，并振荡混匀。

　　以此类推，制成B管10-3稀释液和C管10-4的稀释液。

　　③细菌接种及培养：

　　用无菌微量移液器分别吸取ABC管中的稀释液，向特定选择性培养基TCBS上滴1滴溶液(0.05ml)，并做平行对照组，微微摇晃使液体尽量散开，待液体完全被培养及吸收后，放于25-28℃倒置培养36-48小时后取出计数。

　　④细菌总数计数及计算均值

　　无论细菌菌落大小均要求计数，经计算得每个浓度的计数平均值分别用ABC来表示。

　　⑤结果判定原则：

　　a、首先选择平均菌落在20~200之间的数值作为检测结果，如果只有一项数值介于20~200之间，则选择该数值为最终结果，即若A属于[20，200]，BC不属于[20，200]，则A为最终结果;

　　b、如果有两项数值介于20~200之间，则按以下原则：

　　AB属于[20~200]，C小于20，则选B为最终结果;

　　BC属于[20，200]，A大于200，则选C为最终结果。

　　c、如果ABC均大于200，则选C为最终结果，如果ABC均小于20，则选A为最终结果。

　　d、可以接受的结果：

　　如果AB大于200，C小于20或A大于200，BC小于20，此两种结果可由多种原因导致，需比较实验组和对照平行组来判定是否属于上述几种情况，如果认为结果不能更改，则可选择B为最终结果，B为可接受结果。

　　e、如果除了上述的这些情况外，还出现了其它的结果，则说明实验过程中存在严重的错误，应当重新实验。

　　(2)评分标准：

　　①弧菌总数计数的最终结果若选择A为最终检测结果的记为1;

　　②弧菌总数计数的最终结果若选择B为最终检测结果的记为2;

　　③弧菌总数计数的最终结果若选择C为最终检测结果的记为4;

　　三、安全等级的划分

　　安全等级分成五个等级，具体如下：

　　综合安全等级评分表

　　安全等级 安全 比较安全 一般安全 比较危险 危险

　　综合评分 3、4 5、6 7、8 9、10 12

　　四、等级提升及等级提升原则

　　1、等级提升原理及概念：

　　由于不同致病性细菌或寄生虫对不同生物体造成的危害程度不同，所以每类生物体都有其专属的致病性细菌或寄生虫病，为了更好地体现这种差异性，也为了更准确地出具综合安全等级评价结果，于是引入等级提升的概念：在细菌检测或寄生虫检测中，如果处于优势生长的细菌或寄生虫，恰好为该品种主要细菌病或寄生虫病中的致病性细菌或寄生虫，则需进行等级提升。

　　2、等级提升原则：

　　①范围及条件：当细菌检测和寄生虫检测中的最终判定结果最高级，即评分为4的时候，并且所鉴定的优势菌(种)种类为该样本所列的致病性病源菌(种)，则需进行等级提升;

　　②系统等级提升：在系统综合评分后，将系统的综合安全等级向危险等级方向提升一个等级，即如果系统综合评分为7，系统综合安全等级为一般安全等级，则经过提升后，系统综合安全等级为比较危险等级。